馬氏珠母貝(Pinctada martensii)，又名合浦珠母貝(Pinctada向cata)，隸屬于軟體動(dòng)物門(Mollusca)、瓣鰓綱(Lamelli branchia)、珍珠貝目(Pterioida)、珍珠貝科(Pteriidae)、珠母貝屬(Pinctada)，為我國(guó)南方生產(chǎn)海水珍珠的主要貝類，主要分布于我國(guó)廣西、廣東、海南。合浦珍珠盛產(chǎn)于廣西北海合浦，是我國(guó)國(guó)家地理標(biāo)志產(chǎn)品。除作為名貴高雅的裝飾品，合浦珍珠還是傳統(tǒng)名貴道地藥材，在我國(guó)已有數(shù)千年的藥用歷史。許多中醫(yī)典籍對(duì)合浦珍珠的性味功效皆有明確記載：秦漢時(shí)期的《神農(nóng)本草經(jīng)》記載“珍珠粉可除傷寒熱、濕瘧......久服后，可增強(qiáng)骨節(jié)、殺邪鬼、延大年”；三國(guó)時(shí)期的醫(yī)書《名醫(yī)別錄》已把珍珠列為重要藥材，并闡明了其藥效；南北朝陶弘景所著的《本草經(jīng)集注》記載珍珠“有治目膚翳，止泄”之功；明朝李時(shí)珍所著的《本草綱目》記載：“珍珠味咸，甘寒無毒。鎮(zhèn)心點(diǎn)目。涂面，令人潤(rùn)澤好顏色。涂手足，去皮膚逆臚，墜痰，除面斑，止泄。除小兒驚熱，安魂魄。止遺精白濁，解痘療毒”?，F(xiàn)代典籍《中華人民共和國(guó)藥典》及《中藥大辭典》均記載：“珍珠具有安神定驚、明目去翳、解毒生肌、潤(rùn)澤肌膚”的功效。

珍珠粉自古藥食同源，千百年來一直被奉為純天然養(yǎng)顏美容、養(yǎng)生保健品。比如，CN110240627A公開了一種利用復(fù)合酶從珍珠粉中提取小分子活性肽的方法，包括：將珍珠粉加入到酸溶液中進(jìn)行酸解，收集上清液和第一不溶性蛋白；對(duì)第一不溶性蛋白進(jìn)行水沖泡后離心得到第二上清液和第二不溶性蛋白；合并第一上清液和第二上清液；對(duì)合并后的第一上清液和第二上清液進(jìn)行真空熱濃縮析出乳酸鈣，過濾后與第二不溶性蛋白混合，勻漿制成勻漿液；使用復(fù)合蛋白酶液對(duì)勻漿液在弱酸性條件下進(jìn)行酶解，得到酶解液，所述復(fù)合蛋白酶液包括胰蛋白酶液、木瓜蛋白酶液和角蛋白酶液；對(duì)酶解液進(jìn)行脫色和滅菌，制成液體或粉末形態(tài)的具有美白功效的小分子活性肽。

目前的研究表明，合浦珍珠主要活性物質(zhì)包括微量元素、卟啉及金屬卟啉化合物、鈣類、類胡蘿卜素、維生素B族、小分子活性多肽、多糖、氨基酸以及其他重要的成分。合浦珍珠粉因功效顯著且無毒副作用等特點(diǎn)，常出現(xiàn)在各類方劑、保健品配伍中，發(fā)揮其功效。合浦珍珠粉的活性物質(zhì)鑒定以及藥理作用，是眾多科研工作者的研究方向?，F(xiàn)代研究表明，珍珠粉具有多種作用，包括調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能、抗炎、抗疲勞、抗衰老、抗氧化、美白祛斑、補(bǔ)鈣、抗癌、降血糖、降血脂、抗骨質(zhì)疏松和成骨等多種生物活性，但對(duì)于合浦珍珠粉在抗菌方面的研究相對(duì)較少。

鑒于現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種含小分子活性多肽的合浦珍珠粉提取物及其制備方法和應(yīng)用，該提取物能夠顯著抑制金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、傷寒桿菌、綠膿桿菌的生長(zhǎng)，可用于藥品或保健品和食品添加劑。

為了實(shí)現(xiàn)上述技術(shù)目的，本發(fā)明人結(jié)合多年來對(duì)合浦珍珠的研究經(jīng)驗(yàn)，并通過大量試驗(yàn)研究并不懈探索，最終采用間歇超聲波協(xié)同酸解法提取得到了具有顯著抑菌活性的合浦珍珠粉提取物。

本發(fā)明的技術(shù)方案概括如下：

一種含小分子活性多肽的合浦珍珠粉提取物，其以合浦珍珠粉為原料，采用間歇超聲波協(xié)同酸解提取，離心分離而得，酸解所用的酸液為1-10％的醋酸溶液或乳酸溶液，間歇超聲的功率為200-300W，工作時(shí)間為4-6s，間歇時(shí)間為4-6s，全程為25-35min。

一種含小分子活性多肽的合浦珍珠粉提取物的制備方法，該方法包括如下步驟：

(1)取合浦珍珠粉末，加入1-10％酸液，所述的酸液為醋酸溶液或乳酸溶液，室溫下超聲破碎，超聲條件為：功率200-300W，工作時(shí)間4-6s，間歇時(shí)間4-6s，全程25-35min；

(2)超聲破碎完成后，持續(xù)攪拌4-8h，然后調(diào)節(jié)pH至7.0-7.4，再轉(zhuǎn)移至37-42℃的恒溫環(huán)境中攪拌過夜，結(jié)束后于沸水浴中保持10-20min，采用冷凍離心機(jī)離心，取上清，調(diào)節(jié)pH至7.0-7.4，真空冷凍干燥，得到合浦珍珠粉提取物。

另外，本發(fā)明以合浦珍珠粉為原材料，提取其中有效活性物質(zhì)，采用抑菌圈、最低抑菌濃度以及液體生長(zhǎng)曲線等方法評(píng)價(jià)合浦珍珠提取物的抑菌效果，并探討其抑菌活性的穩(wěn)定性，以及與用酶解法制備的合浦珍珠水解液進(jìn)行抑菌活性比較，為開發(fā)合浦珍珠天然抑菌劑及活性成分的有效利用提供理論依據(jù)。

基于上述研究結(jié)果，本發(fā)明還提供了上述含小分子活性多肽的合浦珍珠粉提取物在制備抗菌產(chǎn)品的應(yīng)用。所述的抗菌產(chǎn)品具有對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、傷寒桿菌和綠膿桿菌的抑制或殺滅活性。進(jìn)一步優(yōu)選地，所述的抗菌產(chǎn)品為藥品、保健品、功能性食品或防腐劑。

本發(fā)明提供的合浦珍珠粉提取物及其制備方法具有如下優(yōu)點(diǎn)：

(1)本發(fā)明合浦珍珠提取物對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、傷寒桿菌和綠膿桿菌的生長(zhǎng)具有非常顯著的抑制活性，活性明顯高于酶解法制備的提取物。

(2)本發(fā)明的合浦珍珠提取物中的活性成分在酸堿條件下均具有穩(wěn)定的抑菌活性，并對(duì)溫度、反復(fù)凍融和紫外線具有較好穩(wěn)定性，對(duì)金屬離子Na+、K+、Ca2+和Mg2+亦具有較好穩(wěn)定性，同時(shí)對(duì)胰蛋白酶具有較好的穩(wěn)定性。

(3)本發(fā)明還具有提取方法簡(jiǎn)易，設(shè)備簡(jiǎn)單，節(jié)能環(huán)保，提取率高的優(yōu)點(diǎn)，提取率高達(dá)83.2％，在藥品以及高級(jí)保健品、功能性食品、抗菌防腐添加劑等方面具有良好的開發(fā)應(yīng)用前景。