細(xì)胞焦亡又稱細(xì)胞炎性壞死，表現(xiàn)為細(xì)胞腫脹變圓、細(xì)胞膜破裂、炎癥因子釋放。近年來的研究證實(shí)，機(jī)體多種細(xì)胞均可發(fā)生焦亡，細(xì)胞焦亡會(huì)發(fā)生細(xì)胞核皺縮、外吐小泡形成焦亡小體。細(xì)胞焦亡是機(jī)體一種重要的天然免疫反應(yīng)，在抗擊感染中發(fā)揮重要作用，然而目前關(guān)于細(xì)胞焦亡的應(yīng)用與轉(zhuǎn)化的研究仍然是缺乏的。

本發(fā)明提供了如下技術(shù)方案：一種制備細(xì)胞外囊泡的方法，包括：建立細(xì)胞焦亡模型以誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生焦亡；獲取直徑2～5μm且包含半胱氨酸天冬氨酸特異性蛋白酶-1的焦亡小體。

本發(fā)明提供所述的細(xì)胞外囊泡在制備腫瘤疫苗或抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。所述腫瘤，包括肺腺癌。

本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)如下：

發(fā)明人通過對(duì)細(xì)胞焦亡形態(tài)學(xué)的反復(fù)驗(yàn)證，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞焦亡過程中產(chǎn)生的外吐小泡，能保留細(xì)胞本身的膜特異性蛋白，并且會(huì)釋放至細(xì)胞外介質(zhì)中，相比于細(xì)胞正常生理狀態(tài)下衍生的細(xì)胞外囊泡凋亡小體，本發(fā)明焦亡小體免疫原性更強(qiáng)，具有很好的免疫激活作用。本發(fā)明提供的細(xì)胞外囊泡焦亡小體的制備方法，獲得的直徑2～5μm焦亡小體保留了原細(xì)胞的膜特異性蛋白，能夠作為判斷機(jī)體具體損傷部位和損傷程度的依據(jù)；腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生的焦亡小體，具有優(yōu)良的抗腫瘤效果，可作為腫瘤疫苗用于預(yù)防或治療腫瘤癌癥。

本發(fā)明焦亡小體的制備方法操作便捷、生產(chǎn)成本低，所得焦亡小體純度高、活性好、保存方便、毒副作用低，利于連續(xù)生產(chǎn)；同時(shí)應(yīng)用途徑廣泛，不僅可作為檢測(cè)損傷部位的特異性標(biāo)記物，并且能夠用于免疫療法，將其作為腫瘤疫苗，從而實(shí)現(xiàn)癌癥的精準(zhǔn)靶向治療，推進(jìn)腫瘤疫苗或藥物的開發(fā)。