銀杉(Cathaya argyrophylla Chun et Kuang)為松科單屬類植物，我國特有 孑遺植物，為國家一級保護珍稀瀕危植物，已被列入極小種群保護物種名錄。 銀杉樹體優(yōu)美，樹干挺拔雄偉，四季長青，葉背面的銀帶極富觀賞性，是珍貴的觀賞樹種。

銀杉古老的起源，對松屬植物的系統(tǒng)發(fā)育和進化、古生物、古氣候、古地 質(zhì)和古生態(tài)方面的研究都有重要的科學(xué)參考價值。

銀杉種群更新困難，幼苗缺乏。與其它松科植物相比，盡管銀杉幼胚數(shù)量 在發(fā)育初期比松屬的少且分裂較晚，但在胚發(fā)育的整個過程與松屬的非常接近。 因銀杉結(jié)實量少，有生活力的種子比例低，且種子和幼苗均易染病。有性繁殖困難，且幼苗成活率低。天然銀杉幼苗生長極其緩慢，幼苗、幼樹死亡率高， 嚴(yán)重制約了銀杉種群的自然更新。以無性繁殖方式是獲得銀杉無性苗和進行種質(zhì)資源建設(shè)的可行途徑之一。

銀杉組織培養(yǎng)育苗的研究主要集中在直接器官發(fā)生方面，如學(xué)者利用銀杉離體培養(yǎng)枝條、子葉、胚軸等在White、1/2MS、WPS培養(yǎng)基上添加6?BA、NAA、2，4?D等生長調(diào)節(jié)劑已誘導(dǎo)出愈傷組織。學(xué)者以銀杉的成熟胚和胚軸在改良的 Monnier培養(yǎng)基上誘導(dǎo)出少量的不定芽，但不定芽無法伸長，無法進一步形成植株。無法建立銀杉組織培養(yǎng)再生植株體系。

當(dāng)前以保護銀杉，增加銀杉植株數(shù)量，擴大銀杉種群以防滅絕，亟待進行。 而開展銀杉離體培養(yǎng)，培養(yǎng)銀杉無性系植株，培養(yǎng)銀杉再生植株，建立銀杉無性繁殖植株再生體系是解決該問題的重要途徑之一。

為了解決上述問題，本發(fā)明提供了一種銀杉的組培繁殖方法。本發(fā)明提供的組培方法不僅可以提高不定芽的誘導(dǎo)率，而且還可以使不定芽增殖并分化出不定根，得到銀杉組培苗。

本發(fā)明提供了一種銀杉的組培方法，包括以下步驟：

將銀杉的外植體接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進行誘導(dǎo)培養(yǎng)，得到銀杉不定芽；誘導(dǎo)培養(yǎng)基包括基本培 養(yǎng)基和6?BA1.5mg/L；誘導(dǎo)培養(yǎng)的基本培養(yǎng)基包括DCR培養(yǎng)基或P6培養(yǎng)基；將銀杉不定芽接種到增殖培養(yǎng)基中進行增殖培養(yǎng)，得到增殖細(xì)胞系； 增殖培養(yǎng)基以DCR培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括6?BA 0.5～1.5mg/L和NAA 0.2～0..6mg/L；將所述增殖細(xì)胞系接種到生根培養(yǎng)基中進行生根培養(yǎng)，得到組培苗；生根培養(yǎng)基以1/2MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括IBA 0.5mg/L和NAA 0.2mg/L。

本發(fā)明具有如下優(yōu)勢：

(1)本發(fā)明采用適宜的誘導(dǎo)培養(yǎng)基能夠使銀杉外植體誘導(dǎo)出不定芽，并使 不定芽增殖分化得到增殖細(xì)胞系，具有誘導(dǎo)率高，不定芽增殖率高，能夠有效 得到完整的銀杉組培苗。

(2)本發(fā)明提供的組培方法，能夠有效增加銀杉植株數(shù)量，擴大銀杉種群， 實現(xiàn)銀杉的防滅絕性保護。