冬蟲夏草，是麥角菌科真菌冬蟲夏草寄生在蝙蝠蛾科昆蟲幼蟲上的子座及幼蟲尸體的復(fù)合體，是一種傳統(tǒng)的名貴滋補(bǔ)中藥材，有調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)功能、抗腫瘤、抗疲勞等多種功效。

冬蟲夏草生長在寒冷高海拔的地區(qū)，其生長的環(huán)境和條件比較苛刻。由于野生蟲草的生長環(huán)境不斷受到破壞，蟲源銳減，加上人為采集的過量過早，導(dǎo)致野生蟲草資源日益匱乏。為了滿足市場需求，人工培養(yǎng)冬蟲夏草成為了主要的來源。

但因?yàn)槠涔に噺?fù)雜，生長周期長及產(chǎn)量低的問題就出現(xiàn)人工發(fā)酵冬蟲夏草的方法。通過科研工作者的不斷研究，發(fā)現(xiàn)人工發(fā)酵蟲草菌絲體其主要藥理藥化成分基本類似于天然蟲草，這就為冬蟲夏草人工發(fā)酵奠定了重要的理論支持。

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種液體發(fā)酵產(chǎn)生冬蟲夏草菌粉的方法，克服了現(xiàn)有技術(shù)中冬蟲夏草液體發(fā)酵周期過長、菌絲得率低以及發(fā)酵罐利用率低等問題。

本發(fā)明包括如下步驟：

1）斜面菌種培養(yǎng)：配制斜面培養(yǎng)基，所述斜面培養(yǎng)基的組分為：葡萄糖15～35g/L、蛋白胨0.5～4g/L、MgSO4·7H2O1～5g/L、KH2PO40.5～1g/L、土豆浸汁150～250mL/L、輔液Ⅰ1～4mL/L、瓊脂20～25g/L、其余為水，pH5.9～6.6，以上各組分除輔液Ⅰ外，于121℃滅菌30min，輔液Ⅰ于118℃單獨(dú)滅菌22min后加入無菌培養(yǎng)基，接種環(huán)粘少量無菌水，把冬蟲夏草菌種從保藏斜面上接入無菌斜面進(jìn)行培養(yǎng)，待斜面長滿新鮮成熟孢子即可；

2）大米孢子培養(yǎng)：配制固料培養(yǎng)基，由固料以及營養(yǎng)液組成，其中固料∶營養(yǎng)液=1g∶（0.5～0.7）mL，固料由大米和麩皮組成，其中大米∶麩皮按質(zhì)量比為7∶3，營養(yǎng)液組分除去瓊脂以外與斜面培養(yǎng)基的組分相同，固料與營養(yǎng)液混勻后75～80℃蒸或煮，冷卻至室溫后將成團(tuán)的大米弄散，裝入K瓶，121℃滅菌30～40min，滅菌完后充分抖散，使固料培養(yǎng)基厚度保持在1～4cm，向長滿孢子的斜面加入無菌生理鹽水，用接種鏟將孢子刮下，將孢子濃度控制在1.0～2.5×10 個(gè)/mL，按固料質(zhì)量體積比的3%～6%將孢子懸液均勻的噴在固料培養(yǎng)基的表面，抖動(dòng)均勻后保持厚度在1～4cm，培養(yǎng)條件為濕度控制45%～55%，溫度控制15～18℃，每隔6h翻抖一次固料，待長出菌絲體后靜止培養(yǎng)，長滿孢子后加入無菌生理鹽水震蕩制成孢子懸液，其中每粒親米孢子數(shù)量為0.02～0.04×10 個(gè)/粒，按照體積比為1%～5%接入一級種子罐培養(yǎng)；

 3）發(fā)酵培養(yǎng)：把步驟2）培養(yǎng)好的孢子接入一級種子罐，培養(yǎng)條件為pH維持在5.9～6.6、溫度18～20℃、罐壓0.03～0.05MPa、通氣比V∶V=1∶（0.5～0.8）、轉(zhuǎn)速為130～170r/min、連續(xù)培養(yǎng)50～70h，待菌絲長稠呈絲狀，菌絲團(tuán)大小均一，有中小空泡即可移入二級發(fā)酵罐；

 4）制備菌粉： 收集發(fā)酵液進(jìn)行過濾，用無菌水洗滌菌體、過濾，重復(fù)三次，然后離心收集菌體，將菌體置于60℃烘干至衡重，用超微粉碎法將干的菌體制成菌粉。

按照上述工藝發(fā)酵生產(chǎn)冬蟲夏草菌粉能夠有效縮短發(fā)酵時(shí)間，約為120～160h，菌體產(chǎn)率達(dá)到4%～6%，菌體干重達(dá)到40～60g/L，提高發(fā)酵罐利用率及產(chǎn)能，節(jié)約生產(chǎn)成本，能達(dá)到工業(yè)化生產(chǎn)的要求。